透析袋使用方法

　　透析袋的使用方法透析原理

　　透析是指溶質從半透膜的一側透過膜至另一側的過程，任何天然的(如腹膜)或人造的半透膜，只要該膜含有使一定大小的溶質通過的孔徑，那么這些溶質就可以通過彌散和對流從膜的一側移動到膜的另一側。

　　透析的動力是擴散壓，擴散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶質在膜內外兩邊的濃度梯度，還正比于膜的面積和溫度，通常是4℃透析，升高溫度可加快透析速度。

　　人體內的毒物包括代謝產物，藥物，外源性毒物，只要其原子量或分子量大小合適，就能夠通過透析清除體外。其基本原理是彌散和對流。彌散就是半透膜兩側液體各自所含溶質濃度梯度及它所形成的不同滲透濃度，溶質從濃度高的一側通過半透膜向濃度低的一側移動。對流也稱超濾，是指溶質和溶劑因透析膜兩側的靜水壓和滲透壓梯度的不同而跨膜轉運的過程。

　　自ThomasGraham1861年發(fā)明透析方法至今已有一百多年。透析已成為生物化學實驗室最簡便最常用的分離純化技術之一。在生物大分子的制備過程中，除鹽、除少量有機溶劑、除去生物小分子雜質和濃縮樣品等都要用到透析的技術。

　　透析只需要使用專用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀，將生物大分子樣品溶液置入袋內，將此透析袋浸入水或緩沖液中，樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內，而鹽和小分子物質不斷擴散透析到袋外，直到袋內外兩邊的濃度達到平衡為止。保留在透析袋內未透析出的樣品溶液稱為“保留液”，袋(膜)外的溶液稱為“滲出液”或“透析液”。

　　透析袋的使用方法

　　使用前處理：

　　1. 把透析袋剪成適當長度(10-20cm)的小段。

　　2. 在大體積的2%(W/V)碳酸氫鈉和 10mmol/L EDTA(pH8.0)中將透析袋煮沸10分鐘。

　　3. 用蒸餾水徹底清洗透析袋。

　　4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將之煮沸10分鐘。

　　5.冷卻后，存放于4度，必須確保透析袋始終浸沒在溶液內。從此時起取用透析袋是必須戴手套。

　　6. 用前在透析袋內裝滿水然后排出，將之清洗干凈。

　　透析膜 (前處理方法如下)：

　　1. 戴手套把透析膜剪成適當長度，浸在蒸餾水中 15 min 泡軟。

　　2. 浸入 10 mM sodium bicarbonate 中，并加熱至 80℃，一邊攪拌至少 30min。

　　3. 換到 10 mM Na2•EDTA 中浸泡 30 min，以新鮮的 EDTA 同樣方法處理三次。

　　4. 再用 80℃ 蒸餾水洗 30 min，然后換到 20% 酒精中，放在 4℃冰箱中保存。